Nuôi cấy mô

Các kỹ thuật tương phản cho nuôi cấy mô

Có nhiều loại tế bào khác nhau được nuôi cấy trong ống nghiệm, bao gồm các tế bào sơ cấp mới lấy từ mô, dòng tế bào bất tử và tế bào gốc. Các loại tế bào khác nhau này có những thách thức tương tự về hình ảnh.

Một trở ngại khi nhìn thấy tế bào là độ trong suốt cao của chúng, hạn chế tính hữu ích của kính hiển vi truyền sáng trường sáng tiêu chuẩn. Vì lý do này, kính hiển vi nuôi cấy mô thường được trang bị để chụp ảnh tương phản pha – một kỹ thuật sử dụng nhiễu để chuyển đổi sự khác biệt nhỏ trong độ dài đường quang thành độ tương phản (ngay cả trong các mẫu vật chủ yếu trong suốt). Điều quan trọng là độ tương phản pha tương thích với các bình nuôi cấy bằng nhựa, không giống như các kỹ thuật phụ thuộc vào độ phân cực như độ tương phản giao thoa khác biệt (DIC).

Chụp ảnh huỳnh quang và nuôi cấy mô

Chụp ảnh huỳnh quang đang trở thành yêu cầu ngày càng thường xuyên trong phòng thí nghiệm nuôi cấy mô. Ví dụ, một nhiệm vụ phổ biến là xác minh biểu hiện của các hợp nhất protein huỳnh quang của các tế bào được chuyển gen – điều quan trọng để đánh giá hiệu quả chuyển gen, vị trí thích hợp và mức độ biểu hiện. Ngoài ra, các vết nhuộm huỳnh quang cũng được sử dụng rộng rãi để hình dung các thành phần phụ tế bào chính (ví dụ: thuốc nhuộm Hoechst để nhuộm nhân trong tế bào sống).

ECLIPSE Ts2-FL có tới ba mô-đun chiếu sáng LED khác nhau do người dùng lựa chọn được tích hợp vào kính hiển vi. Kính hiển vi lưu trữ các mô-đun LED tương thích và vị trí khối lọc, cũng như cài đặt độ sáng được sử dụng gần đây nhất. Nikon cũng cung cấp phụ kiện Contrast Shield tùy chọn để giảm ánh sáng xung quanh nền, một vấn đề thường gặp trong các phòng nuôi cấy có ánh sáng mạnh.

Phụ kiện Contrast Shield tùy chọn chặn ánh sáng trong phòng, cung cấp phương pháp dễ dàng và tiết kiệm chi phí để đạt được tỷ lệ tín hiệu trên nhiễu huỳnh quang cao trong phòng nuôi cấy có ánh sáng mạnh.

Tầm quan trọng của kích thước và sự thoải mái

Công việc nuôi cấy mô thường lặp đi lặp lại, dẫn đến nhu cầu về một hệ thống công thái học chính xác ưu tiên tính dễ sử dụng và tiết kiệm chuyển động. Các điều khiển ECLIPSE Ts2 được nhóm thành các vùng tùy thuộc vào việc chúng được sử dụng để chiếu sáng bằng ánh sáng truyền qua (bên trái của kính hiển vi), huỳnh quang epi (bên phải) hoặc cả hai (ở giữa).

Kính hiển vi nuôi cấy mô thường được đặt bên trong tủ an toàn sinh học để thúc đẩy môi trường vô trùng và giúp bảo vệ sức khỏe tế bào. Do đó, một kính hiển vi nhỏ gọn có thể có lợi cho công việc như vậy. Ngoài ra, bệ được đặt thấp trên cơ thể, giúp việc trao đổi mẫu lặp đi lặp lại trở nên công thái học hơn khi thực hiện ở tư thế ngồi so với kính hiển vi có bệ được đặt cao hơn trên cơ thể.

Có thể chứa các đĩa, đĩa và bình
Đây là các loại bình thường được sử dụng để nuôi cấy tế bào. Danh mục này đề cập đến tính khả dụng của các giai đoạn/chèn Nikon cho các bình có kích thước tiêu chuẩn.

Độ tương phản pha Apodized
Độ tương phản pha Apodized là một biến thể của kỹ thuật được tối ưu hóa để quan sát các khu vực có các đối tượng pha mạnh, chẳng hạn như nhiễm sắc thể trong tế bào nguyên phân. Kỹ thuật này cũng hữu ích để quan sát các lát cắt mô.

Tích hợp máy ảnh
Nikon sản xuất và phân phối nhiều loại máy ảnh phù hợp với các nhiệm vụ liên quan đến nuôi cấy mô.

Tương thích với khử nhiễm bằng H2O2 bay hơi
Khử nhiễm bằng hydro peroxide bay hơi là một tiêu chuẩn công nghiệp cho các không gian kín. Kỹ thuật này được áp dụng rộng rãi trong các bệnh viện và cơ sở nghiên cứu y tế.

Nikon Emboss Contrast
Nikon’s Emboss Contrast là một kỹ thuật đơn giản để quan sát các tế bào với độ nổi giống 3D. Kỹ thuật này dành cho các loại tế bào dày, chẳng hạn như tế bào trứng và tế bào gốc đa năng cảm ứng (iPSC).

Phase Contrast
Kính hiển vi tương phản pha là tiêu chuẩn phòng thí nghiệm lâu đời để quan sát các tế bào bám dính có hình thái giống biểu mô hoặc nguyên bào sợi. Điều này bao gồm MDCK, HeLa, HEK và nhiều dòng tế bào phổ biến khác.

Thích hợp cho các cơ sở sản xuất tế bào
Điều này đề cập đến việc liệu các hệ thống có khả năng thực hiện các loại xét nghiệm phổ biến được áp dụng trong các cơ sở sản xuất tế bào hay không (ví dụ: xác định khuẩn lạc tế bào gốc).

Thích hợp cho kết quả chuẩn hóa
Điều này đề cập đến sự kết hợp giữa hình ảnh toàn bộ mạch máu và phân tích để định lượng chính xác các thông số chính theo cách giảm thiểu khả năng xảy ra lỗi do các yếu tố như phán đoán của người vận hành và kích thước mẫu không đủ.

Huỳnh quang trường rộng
Kính hiển vi huỳnh quang là cần thiết để quan sát các thành phần tế bào được gắn nhãn bằng protein huỳnh quang hoặc nhuộm huỳnh quang.